Pembuatan media Mac Conkey dan EMB (Eosin Metilyene Blue )

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI

AKADEMI ANALIS KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURABAYA

2004

v  Hari/ Tgl. Praktikum:

 Senin, 12 Maret 2004

v  Materi Praktikum:

- Pembuatan media Mac Conkey dan EMB (Eosin Metilyene Blue )

v  Tujuan Praktikum:

Untuk mengetahui cara pembuatan media Mac Conkey dan media EMB (Eosin Metilyene Blue)

v  Alat dan Bahan:

-          Alat:

1.      Erlenmeyer

2.      Petridisk

3.      Tabung reaksi

4.      Batang pengaduk

5.      Lampu spirtus

6.      Gelas ukur

7.      Timbangan

8.      Lidi panjang 20 cm

9.      Autoclave

10.  Kertas PH

-          Bahan:

1.      Mac Conkey

2.      EMB (Eosin Metilyene Blue)

3.      Aquades

4.      Hcl

5.      NaOH

v  Prosedur Kerja:

1.Mc Conkey

    Fungsi: Untuk membedakan kuman-kuman yang meragi laktosa dengan kuman –kuman tidak meragi lactose serta mengisolasi gram (-) karena menghambat pertumbuhan kuman gram (+).

-          Membuat 5 plate       @ 17x5= 85          100 cc

-          Perhitungan : 50    x 100 = 5 gram

                            1000

-          Timbang Mc Conkey 5 gram dilarutkan dengan aquades 100 ml kemudian diaduk sampai rata

-          Dipanaskan sampai larut dan mendidih

-          Diukur dengan PH pada PH ± 7,2. Jika PH kelebihan Maka ditambah dengan HCl dan jika kekurangan PH maka ditambah dengan NaOH

-          Sterilkan dalam autoclave pada suhu 121^oC selama 15 menit

-          Dituangkan dalam petridisk

2.EMB (Eosin Metilyene Blue)

    Fungsi: Untuk membedakan golongan enterobacteriace serta mengisolasi kumangram (-) karena menghambat kuman gram (+).

-          Membuat 5 plate @ 17 x 5 = 85             100 cc

-          Perhitungan :  36       x 100 =3,6

                             1000

-          Timbang 3,6 gram EMB larutkan dalam aquades 100 ml. Kemudian dilarutkan sampai rata

-          Panaskan hingga larut sempurna dan sampai mendidih

-          Dukur dengan PH ± 7,2.Jika kelebihan maka ditambah dengan HCl dan bila kekurangan maka ditambah dengan NaOH

-          Sterilkan dalam autoclave 121^oC selama 15 menit

-          Kemudian tuang dalam petridisk

v  Hasil Pengamatan:

1.      Mc Conkey

Warna dari Mc Conkey adalah merah kecokelatan

 

2.      EMB (Eosinofil Metilyene Blue)

Warna dari EMB adalah merah

 

v  Gambar:

Terlampir

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI

AKADEMI ANALIS KESEHATAN

UNIVERSITS MUHAMMADIYAH SURABAYA

2004

v  Hari / Tgl. Praktikum : Senin, 26 April 2004

v                   Judul praktikum          : Membuat media KIA (Kilgler’s Iron Agar) dan Simonns Citrate

v                   Tujuan praktikum        : Untuk mengetahui cara pembuatan media KIA dan Simons Citrate

v  Alat dan bahan             :

           Alat : - Gelas kimia

-          Timbangan

-          Gelas ukur

-          Batang pengaduk

-          Tabung reaksi kecil

-          Kertas pH

-          Api spritus

           Bahan : -KIA

-          Simons Citrte

-          Aquades

v  Prosedur kerja              :

1.      Kilgler’s Iron Indol (KIA)

Prinsip : Menentukan kemampuan organisme untuk menyerang suatu karbohidrat yang tergabung dalam pembenihan basal, dengan tanpa pembentukan gas disertai penentuan kemungkinan terbentuknya H₂S.

-          Membuat 5 tabung @ 5 ml x 5 = 25

-          Komposisi : glukosa dan laktosa dengan perbandingan 1: 10

-          KIA =  55    X  25  =  1,375gr

                        1000

-          Menimbang KIA 1,375gr dilarutkan dalam 25 ml aquades hingga larut

-          Panaskan hingga larut sempurna, lalu di pH 7,4

-          Masukkan dalam tabung reaksi kecil dan tutup dengan kapas steril

-          Disteril dalam aotoclave 121⁰C selama 15 menit

-          Dinginkan dengan posisi miring atau berlereng dan berdasar

2. Simons Citrate Agar

Prinsip : Menentukan apakah suatu organisme dapat menggunakan citrat sebagai satu-satunya sumber karbon untuk metabolisme dengan menghasilkan suasana basa

-          Membuat 5 tabung @ 5 ml x 5 = 25

-          Simons Citrate Agar =   23    X  25  =  0,575gr

                                                                1000

            

-          Menimbang SCA 0,575 gr dilrutkan dalam 25 ml aquades

-          Panaskan hingga larut sempurna, lalu di pH 6,8-7,0

-          Dimasukkan dalam tabung reaksi kecil dan ditutup kapas steril

-          Disteril dalam aotoclave 121⁰C selama 15 menit

-          Dinginkan dengan posisi miring atau slant

v  Hasil pengamatan         :

  

v  Gambar                         :

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI

AKADEMI ANALIS KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURABAYA

2004

v  No./ Hari/ Tgl. Praktikum  : 3/Senin/17 Mei 2004

v  Judul praktikum                 : Pembuatan Air Peptone, gula-gula dan Semi Solid

v  Tujuan praktikum              : Mengetahui pembuatan Air Peptone, gula-gula

                                                   Dan Semi Solid.

v  Alat dan bahan                   :

Alat :

-          Erlenmeyer

-          Tabung reaksi

-          Rak tabung

-          Timbangan

-          Kertas pH

-          Aotoclave

Bahan :

-          Glukosa

-          Laktosa

-          Maltosa

-          Sukrosa

-          Manosa

-          Air Peptone

-          Semi Solid

v  Prosedure Kerja :

  

1.                  Air Peptone membuat 150 ml :

             Tujuan: Untuk mengetahui apakah organisme menghasilkan indol dan triptofon

a.Peptone = 10 gr       X    150  =  1,5 gr

                                                1000

                        b.   NaCl     =  5gr      X   150     =   0,75 gr

                                               1000

                        c.   Aquades 1000 ml          150 ml

d.      Cara : 1,5 gram peptone + 0,75 gr NaCl dilarutkan dengan aquades    150 ml dipanaskan hingga larut lalu di pH=7,4

 

2.      Gula-gula :

       Tujuan : Untuk menentukan kemampuan organisme melakukan fermentasi karbohidrat tertentu yang tergabung dalam medium dasar dan membentuk asam dan gas

a. Air peptone 100 ml        25 ml

b. Gula =  1       X  25 = 0,25 gr

                      100

      c. BTB 0,4 %       =    1     X  25 = 0,25 ml

                                       100 

      d. cara :

          Larutkan gula (glukosa,sukrosa,laktosa,maltosa, manosa ) dengan air peptone @25ml

          Dipanaskan sampai larut hampir mendidih, tambahkan BTB 0,4 % sebanyak 0,25 ml sampai pH 7,6.

-          Glukosa : masukkan ke tabung kecil berisi tabung Durham @ 4-5 ml dan ditutup dengan kapas warna merah dan disteril dalam aotoclave pada suhu 121⁰ C selama 15 menit.

-          Sukrosa : masukkan dalam tabung kecil dan tutup dengan kapas warna biru disteril dalam aotoclave 121^o C selama 15 menit.

-          Laktosa : masukkan dalam tabung kecil dan tutup dengan kapas warna kuning dan disteril dalam aotoclave 121⁰ C selama 15 menit.

-           Maltosa : masukkan dalam tabung kecil dan tutup dengan kapas warna hijau dan disteril dalam aotoclave 121⁰ C selama 15 menit.

-          Manosa : masukkan dalam tabung kecil dan tutup dengan kapas warna putih dan disteril dalam aotoclave 121⁰ C selama 15 menit

3.      Semi solid :

Prinsip: Menentukan apakah suatu organisme (kuman bergerek atau tidak)

a.       Pepton = 5       X 30 = 0,15 gr

                                       1000

                  b     NaCl  = 5        X 30 = 0,15 gr

                                       1000

                  c.     Bacto agar =    3,4     X 30  =0,102 gr

                                                  1000

                  d.      Aquades 1000 ml             30 ml

o      Cara kerja:

-          0,15 gr pepton + 0,15 gr NaCl + 0,102 gr Bacto agar, lalu dilarutkan dalam 30 ml aquades.

-          Panaskan hingga larut sempurna lalu di pH 7,6.

-          Tuang dalam tabung reaksi kecil, lalu disterilan dalam aotoclave 121⁰ C selama 15 menit.

-          Dinginkan dengan tegak lurus

v   Hasil pengamatan:

v   Gambar terlampir

        

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI

AKADEMI ANALIS KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURABAYA

2004

v   Hari/Tgl. Praktikum :  Senin, 31 Mei 2004

v  Judul praktikum             :  Pembuatan BAP, MSA, Nutrien agar

v  Tujuan praktikum           : Untuk mengetahui cara pembuatan BAP, MSA, Nutrien Agar

v  Alat dan bahan                :

Alat:

-          Timbangan

-          Api spritus

-          Tabung reaksi

-          Gelas kimia

-          Erlemeyer

-          Batang pengaduk

-          Gelas ukur

Bahan:

-          BAP

-          MSA

-          Nutrien agar

-          Darah

-          Aquades

v    Prosedur kerja           :

            1. Membuat 5  petridisk

        - . BAP =   40    X 60 = 2,4gr

1000

-          Menimbang BAP 2,4gr lalu dilarutkan dalam 60ml aquades

-          Dipanaskan hingga larut sempurna

-          Di pH 7,3

-          Ditutup dengan kapas steril dan dibungkus dengan almunium foil dan diikat dengan benang

-          Disteril dalam aotoclave 121⁰ C selama 15 menit

-          Ditambah dengan darah golongan O sebanyak 3 cc

-          Dituang dipetridisk dengan disterilkan

2. Membuat 2 petridisk

       - MSA =  111   X 35  = 3,8gr

                            1000

-          Menimbang MSA 3,8gr lalu dilarutkan dalam 35 ml aquades

-          Dilarutkan hingga rata lalu dipanaskan hingga larut sempurna

-          Di pH 7,5

-          Ditutup dengan kapas steril dan dibungkus dengan almunium foil dan diikat dengan benang

-          Disteril dalam aotoclave 121⁰ C selama 15 menit

-          Dituang dipetridisk

   3. NAS(Nutrien Agar Slank)

-          Membuat 5 tabung

-          Nutrien Agar = 20    X 30 = 0,6gr

                                1000

- Bacto agat =    5   X 30   = 0,15 gr

                         1000

-          Menimbang nutrien agar 0,6gr + bacto agar 0,15gr dilarutkan dalam 30ml aquades

-          Dipanaskan hingga larut sempurna

-          Dituang dalam tabung reaksi kecil ditutup dengan kapas steril

-          Disteril dalam aotoclave 121⁰ C selama 15 menit

v  Hasil pengamatan:

-          Warna BAP  kuning menjadi merah

-          Warna MSA merah

-          Warna NAS        

v  Gambar terlampir                          :

       

            

                  

• Tweet
• Share
• Share
• Share
• Share

About SiChesse

Di blog ini juga Saya membagikan beberapa hasil karya tulis Saya seperti yang bisa sobat baca secara gratis. Harapan Saya yaitu semoga blog ini dapat memberikan kontribusi yang bermanfaat bagi sobat semua.

Related Post